BANDYMO SANTRAUKA IR PAAIŠKINIMAS
Leptospirozė pasitaiko visame pasaulyje ir yra dažna nuo lengvos iki sunkios žmonių ir gyvūnų sveikatos problema, ypač karšto ir drėgno klimato vietovėse.Natūralūs leptospirozės rezervuarai yra graužikai, taip pat daugybė naminių žinduolių.Žmogaus infekciją sukelia L. interrogans, patogeninis Leptospira genties narys.Infekcija plinta per šeimininko gyvūno šlapimą.
Po užsikrėtimo leptospirai yra kraujyje, kol jie išnyksta praėjus 4–7 dienoms po anti-L susidarymo.interrogans antikūnų, iš pradžių IgM klasės.Kraujo, šlapimo ir smegenų skysčio pasėlis yra veiksminga priemonė diagnozei patvirtinti per 1–2 savaites po poveikio.Serologinis antiL aptikimas.interrogans antikūnai taip pat yra dažnas diagnostikos metodas.Galimi šios kategorijos testai: 1) mikroskopinis agliutinacijos testas (MAT);2) ELISA;3) Netiesioginiai fluorescenciniai antikūnų tyrimai (IFAT).Tačiau visiems aukščiau paminėtiems metodams reikia sudėtingos įrangos ir gerai apmokytų technikų.
Leptospira IgG/IgM yra paprastas serologinis tyrimas, kurio metu naudojami L. interrogans antigenai ir vienu metu aptinkami IgG ir IgM antikūnai prieš šiuos mikroorganizmus.Testą gali atlikti neapmokytas arba minimalios kvalifikacijos personalas, nenaudodamas sudėtingos laboratorinės įrangos, o rezultatą galima gauti per 15 minučių.
PRINCIPAS
Leptospira IgG/IgM greitojo testo rinkinys yra šoninio srauto chromatografija
imunologinis tyrimas.Bandomąją kasetę sudaro: 1) bordo spalvos konjugato padėklas, kuriame yra rekombinantiniai L. interrogans antigenai, konjuguoti su koloidiniu auksu (Leptospira konjugatai) ir triušio IgG-aukso konjugatai, 2) nitroceliuliozės membranos juostelė, kurioje yra dvi bandomosios juostos (M ir G juostos). ir valdymo juosta (C juosta).M juosta iš anksto padengta monokloniniu anti-žmogaus IgM, skirtu anti-L.. interrogans IgM aptikti, G juosta iš anksto padengta reagentais, skirtais anti-L aptikti.interrogans IgG, o C juosta iš anksto padengta ožkos antitriušio IgG.
Kai į kasetės mėginio duobutę išleidžiamas pakankamas tiriamojo mėginio tūris, mėginys kapiliariniu būdu migruoja per kasetę.IgM anti-L.. interrogans, jei jų yra mėginyje, prisijungs prie Leptospira konjugatų.Tada imunokompleksas užfiksuojamas ant membranos iš anksto padengtu anti-žmogaus IgM antikūnu, sudarydamas bordo spalvos M juostą, rodančią teigiamą L.. interrogans IgM testo rezultatą.IgG anti-L.. interrogans, jei jų yra mėginyje, prisijungs prie Leptospira konjugatų.Tada imunokompleksą užfiksuoja iš anksto padengti reagentai ant membranos, sudarydami bordo spalvos G juostą, rodančią teigiamą L.. interrogans IgG testo rezultatą.
Testo juostų (M ir G) nebuvimas rodo neigiamą rezultatą.Teste yra vidinė kontrolė (C juosta), kurioje turėtų būti bordo spalvos imunokomplekso ožkos antitriušio IgG/triušio IgG-aukso konjugato juostelė, neatsižvelgiant į bet kurios bandomosios juostos spalvos išsivystymą.Priešingu atveju tyrimo rezultatas neteisingas ir mėginys turi būti iš naujo patikrintas kitu prietaisu.
